TÉCNICA HYBRID CAPTURE 2 PARA CÁNCER DE CUELLO UTERINO

Se basa en la hibridación con sondas de ARN complementarias de la secuencia genómica de 13 tipos de VPH de alto riesgo oncogénico, utiliza una fase liquida que permite la hibridación por complementariedad del ADN viral con el ARN sintético de 13 genotipos de VPH. La hibridación es captada por anticuerpos fijados en los pozos de la microplaca, se elimina el exceso de reactivos, se agrega un revelador luminiscente y la emisión de luz es proporcional a la cantidad de ADN, otorgando una medida semicuantitativa de la carga viral. (1)

Bibliografía:

1) Rincón D, Morales L, Rincón B. Modernas metodologías diagnósticas para la Detección del Virus del Papiloma Humano y prevención del cáncer de cuello uterino. Rev. de la Universidad Industrial de Santander. [Internet] 2017[citado 24 de nov del 2019].49(3).Disponible en:http://www.scielo.org.co/pdf/suis/v49n3/0121-0807-suis-49-03-00478.pdf

PRUEBA DE REACCIÓN EN CADENA DE LA POLIMERASA EN EL CÁNCER DE CUELLO UTERINO

T: Evaluación de las técnicas de detección del VPH en los programas de cribado para cáncer de cuello uterino.

O: Identificar los tipos de VPH con mas alto índice de riesgo para el cribado de cáncer de cuello uterino, para mejorar las técnicas de tamizaje poblacional.

M: 166 muestras cervicales procedentes de mujeres atendidas en una clínica de dermatología en Oviedo 

A.N: ADN viral de VPH

G: 

Gen:                                                                             Pares de bases

 L1 del VPH                                                                 8000pb

EXT: PCR-EIA

Ciclos                                                       Temperatura                  Tiempo

                                                                      55°                              2h

 40 ciclos                                                       95°                             10min

                                                                      72°                             1min

PCR-LBH: reverse line blot hybridization

                                                                      95°                             9min

40 ciclos                                                        95°                             1min

                                                                      55°                             1min

                                                                      72°                             1min

V: 

Especificidad: VPH 16= 70.6%      VPH 18= 88%

Bibliografía:

Cañadas M, Lloveras B, Lorincz A, Ejarque M, Font R, Bosch F, Sanjóse F. Evaluación de la técnicas de detección del VPH en los programas de cribado para cáncer de cuello uterino.Rev Scielo [Internet].2016[citado 16 de nov 2019]48(5):372-378.Disponible en:https://www.scielosp.org/scielo.php?pid=S0036-36342006000500003&script=sci_arttext&tlng=pt

PRUEBA DE TAMIZAJE Y CONFIRMATORIA DEL CÀNCER DEL CUELLO UTERINO

Una prueba de tamizaje es la Colposcopia en la cual se visualiza el epitelio y la trama sub epitelial del cérvix, contribuye con el diagnóstico, extensión de la lesión y características. Con sensibilidad 83% especificidad 86% (1). Una prueba confirmatoria es el test de VPH  consiste  en  la  amplificación del DNA viral, la prueba HC2, se basa en la hibridación del DNA-VPH usando sonda de RNA complementaria a una secuencia común para 13 tipos de VPH, que reaccionan con anticuerpos monoclonales que revelan el virus por quimioluminiscencia.(2)(3)

Colposcopia

Bibliografìa:
1) Samperio J, Salazar A. Eficacia de las pruebas diàgnosticas del Càncer cervicouterino y Virus del Papiloma Humano.Journal [Internet].2019 [citado 10 de nov 2019]; 4(5):51-66.Disponible en:file:///C:/Users/DR.%20ORANGE/Downloads/2953-Texto%20del%20art%C3%ADculo-11051-1-10-20190410.pdf
2) Enrique I, Rea D, Rubio J, Romero L, Salaicela J, Vallejo J, et al. TEST de virus del papiloma humano como mètodo de screening primario para el diàgnostico de neoplasias de cèrvix uterino. Revista cientìfica CSSN. [Internet]. 2017 [citado 10 de nov 2019];8:59-72.Disponible en:http://revistas.espoch.edu.ec/index.php/cssn/article/view/8/8
3) Li W, Padilla C, Gutierrez E, Hijar G. Detección molecular y genotipificación de virus del papiloma humano  como tamizaje de cáncer de cuello uterino:Posibilidades en el contexto peruano.Bol Inst Nac Salud.[Internet].2016[citado 10 de nov 2019];22(1-3):22-8.Disponible en:http://repositorio.ins.gob.pe:8083/xmlui/bitstream/handle/INS/907/2016%281-3%2922-28.pdf?sequence=1&isAllowed=y

ALTERACIONES DE LA EPIGENÓMICA EN EL CÁNCER DE CUELLO UTERINO

Las alteraciones epigenéticas en el CaCU son la hipermetilación de SOX y WT1 que se asocia al desarrollo de lesiones precursoras y de hTERT que se asocia con su progresión. También existen alteraciones en las formas fosforiladas y acetiladas de la histona H3. El gen RARbeta2 se ha encontrado silenciado debido a la metilación de su promotor. De igual forma  las secuencias miR-143, miR-145, miR-99a, miR-26a, miR-203, miR-513, miR-29a y miR-199a está significativamente disminuida la expresión en lesiones precursoras de este tipo de cáncer.(1)(2)

 Los tres mecanismos principales de regulación epigenética. A) Mecanismo de silenciamiento de genes por metilación. Las enzimas de la familia DNMT metilan sitios CpG. Esta metilación está generalmente asociada a la represión transcripcional. En contraste, la desmetilación de estos sitios facilita la expresión génica. B) Mecanismo de apertura y cierre de la cromatina por acetilación y desacetilación de histonas. Las modificaciones de histonas provocan cambios en su interacción con el DNA, lo cual se asocia con la expresión o represión de genes. C) Los lcRNAs pequeños o largos regulan la expresión de RNAs codificantes por degradación o por interacción directa en el locus génico

Bibliografía:
1)Romero M, Valladares G, Sanchéz P.Epigenetic alterations in cervical cancer progression.Rev med  Inst Mex[Internet].2015[citado 3 oct 2019];53:212-217.Disponible en:https://www.medigraphic.com/pdfs/imss/im-2015/ims152o.pdf
2)Tume L.Las alteraciones epigenéticas en la progresión del cáncer.Gaceta mexicana de oncología.[Internet].2016[citado 3 oct 2019];13(4):236-243.Disponible en:https://www.elsevier.es/es-revista-gaceta-mexicana-oncologia-305-pdf-X1665920114579068